产品简介

品牌 货号 规格 供货周期 应用领域

自营品牌	AP34L014/AP34L015
100mL	现货
生物产业

D3030L1260 EZ ECL plus化学发光液（增强型）用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统，可使用更高的抗体稀释倍数（1:2000～1:10000），极其节省抗体, 可检测低皮克级的蛋白，操作步骤无需进行特别优化。灵敏度高，信号持续时间长达5小时，不但适用于Xjiaopian、也可用CCD或激光成像仪成像。

详细介绍

EZ ECL plus化学发光液（增强型）

产品描述EZ ECL plus化学发光液（增强型）用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统，可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)，极其节省抗体, 可检测低于皮克级的蛋白，操作步骤无需进行特别优化。灵敏度高，信号持续时间长达5小时，不但适用于Xjiaopian、也可用CCD或激光成像仪成像。订购信息

产品名称	货号	规格	价格
EZ ECL 增强型化学发光液	AP34L014	100 mL	300
EZ ECL 增强型化学发光液	AP34L015	500 mL	1200

产品组分

组分名称	A液	B液
AP34L014（100 mL）	50 mL	50 mL
AP34L015（500 mL）	250 mL	250 mL

保存方法常温运输，4℃避光干燥保存，有效期12个月。使用方法1. 执行常规SDS-PAGE、转膜、洗膜。注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。【注】：推荐将一抗浓度稀释到0.5 μg/mL（0.05～1 μg/mL均可）， 将二抗浓度稀释到0.02 μg/mL（0.005～0.04 μg/mL均可）。2. 后1次洗膜的同时，新鲜配制发光工作液，根据用量将两种组份按1:1比例混合均匀，备用。【注】：（1）短时间暴露于日光灯下不会损害该工作液，但为获得合适结果，将此工作液保存在棕色瓶中，避免暴露于任何强光。（2）取A液和B液一定要用不同的枪头，工作液现配现用，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。3. 用平头镊取出膜，搭在滤纸上沥干洗液（勿使膜完全干燥)。用移液器将工作液加到膜上（推荐1 cm²膜加150 μL发光液），使之充分接触。室温孵育5 min，准备立即压片曝光。4. 用平头镊子夹起膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体，留下少量工作液，不可使膜完全干燥。5. 在X光jiaoppian暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将印迹膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹印迹膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。6. 在黑暗中将X感光jiaopian放置在包裹的保鲜膜上，根据蛋白浓度曝光适当时间（根据光强度需摸索曝光时间，一般30s-2min），显影冲洗。 【注】：根据经验，如果背景过高，可使用两张X感光jiaopian同时压片。注意事项

步骤1～5可在日光灯下操作，但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作可以避免。戴手套可以避免在膜上留下手印。

长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系，曝光不足则条带模糊。

发光工作液孵育约3 min后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光jiaopian曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光，因而弱带可曝光1~10 h。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL发光和曝光。

由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗1:1000～1:4000，二抗1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。

某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。

使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可准确确定胶片上条带的位置和大小。

NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗体应避免使用NaN₃，如必需使用勿超过0.01%。相关试剂推荐ECL化学发光液（超敏型）（货号：AP34L024）ECL化学发光液（飞克级）（货号：AP34L034）